Способы заполнения лимфатической системы при использовании коммерческой ММА
Заполнение лимфатической системы может осуществляться при этом способе подготовки инъекционной массы несколькими путями: посредством прямой наливки, интерстициальной инъекции, ретроградного введения смолы, а также трансгемокапиллярной инъекции.
Смотрите - Подготовка коммерческого ММА
Наблюдения показали, что последний способ выявления корней лимфатической системы особенно эффективен при введении инъекционной массы в кровеносное русло сокращающихся органов (например сердца), а также при некотором повышении инъекционного давления или же после местной аппликации гистамина. При этом все три компартмента, или отсека системы микроциркуляции (кровеносный, интерстициальный и лимфоносный), на слепках выглядят неразрывно связанными. Этот способ инъекции дает важные сведения о путях распространения растворов в интерстициальном пространстве; он имеет определенную ценность и для изучения топологических взаимоотношений кровеносных и лимфоносных звеньев микроциркуляции.
Процедура получения коррозионных препаратов (инъекционных реплик) для СЭМ детально описана в нашем обзоре [Караганов Я. Л. и др., 1981б], а также в ряде предыдущих работ [Караганов Я. Л. и др., 1979; Миронов А. А., и др., 1979; Nowell J., Lohse С., 1974; Murajkami Т., 1978; Gannon В., 1978]. Она включает ряд этапов: подготовку сосудистого русла для инъекции пластических масс, введение последних и их полимеризацию, коррозию тканей, высушивание реплик, микродиссекцию образцов, монтирование реплик и некоторые специальные манипуляции, способствующие дифференцированному изучению элементов микрососудистого русла, маркировке межклеточных контактов и др.
Полимеризация инъекционных масс
Полимеризации инъекционных масс чаще всего достигают путем погружения животного или изолированного органа в ванну с горячей (50—60 °С) водой на 6 ч. После этого проводят коррозию тканей с помощью 20—30% раствора щелочи (в случае использования латексов в качестве коррозионного средства применяют кислоты). Для ускорения коррозии последнюю сочетают с периодическим промыванием водой.
Очищенные и высушенные образцы (при получении ригидных реплик допускается высушивание на воздухе) монтируют на предметный столик с помощью кондуктивного клея и напыляют порошками тяжелых металлов (серебро, золото, платина).
Нанесение кондуктивного клея можно проводить как с помощью специальной аппаратуры (ионный распылитель, универсальный вакуумный пост), так и путем экспозиции в парах осмия с последующим закреплением последнего на реплике гидроокисью гидразина или погружением в водный или спиртовой раствор коммерческого антистатика.
С помощью описанного выше метода уже получена первичная информация, отражающая стереологические особенности строения лимфатического русла печени [Magari S. et al., 1977], легких [Kobayashi S. et al., 1976], сердца [Караганов Я. Л. и др., 19816] и лимфатических узлов [Kurokava Т., Ogata Т., 1980].
«Микролимфология», В.В.Купирянов, Ю.И. Бородин
Читайте далее:
