Ряд ограничений и артефактов присущих методу инъекционных реплик
Накопленный опыт позволяет отметить ряд ограничений и артефактов присущих методу инъекционных реплик:
- некоторое искажение реальной структуры микрососудов, возникающее в процессе получения реплик;
- потеря ряда ультраструктурных деталей на репликах (неполное копирование);
- невозможность одновременного изучения строения стенки лимфатических капилляров (сосудов) и окружающей их соединительной ткани.
Одной из главных ошибок, подстерегающих исследователей, использующих вышеописанный метод, является возможность неверной интерпретации картин тканевых каналов, которые могут быть приняты за лимфатические микрососуды.
Правильный выбор инъекционной массы, тщательный контроль каждого этапа при подготовке реплик и комбинация с другими методами исследования — единственно возможный путь преодоления ограничений данного метода и возможных ошибочных интерпретаций.
СЭМ клеточных поверхностей и неклеточных структур
СЭМ клеточных поверхностей и неклеточных структур создала принципиально новые возможности для получения зрительной информации о стереологической структуре эндотелиальных клеток, изучения тончайших деталей рельефа их поверхности, положения клеток в пласте и межклеточных взаимоотношений. Получена новая информация, отражающая особенности пространственной организации корней лимфатической системы в некоторых органах [Арутюнов В. Д. и др., 1976; Cullan G., Todd G., 1977; Leak L., 1977]. Начаты исследования крупных лимфатических сосудов и протоков [Gneep D., Green F., 1979; 1980; Albertini К. et al., 1980].
Процедура подготовки биологических объектов для СЭМ
Процедура подготовки биологических объектов для СЭМ описана в монографии Ю. А. Ровенского (1979). Она включает следующие этапы: фиксацию образцов, их обезвоживание, высушивание, монтирование и напыление. Высушивание образцов является одним из важнейших этапов. В настоящее время принято считать, что высушивание путем перехода критической точки жидкого СО2 является наиболее адекватным методом подготовки биологических образцов для СЭМ.
Для повышения эффективности этого метода применяются специальные высушиватели, которые отечественная промышленность, к сожалению, пока не выпускает.
Существенным недостатком всех методов высушивания является значительная (до 60%) потеря объема тканей.
«Микролимфология», В.В.Купирянов, Ю.И. Бородин
Читайте далее:
