Главная / Микролимфология / Методы исследования лимфоносных микрососудов / Методы электронно-микроскопического изучения лимфоносных микрососудов

Методы электронно-микроскопического изучения лимфоносных микрососудов

Несмотря на ценность методов микроскопического анализа лимфатических микрососудов, нельзя не отметить тех уникальных возможностей, которые открываются перед исследователями в связи с использованием методов электронной микроскопии1.

Это стало очевидным сразу же вслед за появлением первых публикаций в нашей стране [Жданов Д. А., Шахламов В. А., 1964; Шахламов В. А.. 1971] и за рубежом [Paley S., Karlin L., 1959; Casley-Smith J., Florey H., 1961; Leak L., Burke J., 1966], посвященных описанию ультраструктуры стенки лимфатических капилляров. В настоящее время трансмиссионная электронная микроскопия (ТЭМ) широко используется для изучения функциональной морфологии корней лимфатической системы [Шахламов В. А., 1971; Чернух А. М. и др., 1975; Зербино Д. Д., Плешаков Е. В., 1979; Чернух А. М., 1979; Сатюкова Г. С. и др., 1981; Куприянов В. В., 1981; Караганов Я. Л. и др., 1982; Пестерева Н. А., 1981] особенно в сочетании с прижизненными наблюдениями [Rtiodin J., Sue S., 1979] и методом «молекулярных зондов», предусматривающим введение в циркуляцию тест-молекул (трассеров), обладающих различными размерами и молекулярной массой [Буланова В., Санин М. Р., 1977; Leak L., 1972, 1977, 1980; Casley-Smith J., 1977; Bettendorf U., 1979; O´Morchoe P. et al., 1980].

Вместе с тем следует отметить, что сканирующая электронная микроскопия (СЭМ) только начинает внедряться в практику исследований лимфатической системы. Приоритет в этой области принадлежит советским ученым. В 1976 г. В. Д. Арутюнов и соавт. опубликовали первые иллюстрации, отражающие стереологические особенности строения лимфатических капилляров. В последнее время отмечается увеличение интереса лимфологов к СЭМ за рубежом [Leak L., 1977; Gnepp D., Grenn H., 1979].

Явное отставание в области освоения методов СЭМ лимфологами по сравнению со специалистами, изучающими кровеносные сосуды, повидимому, связано с нечеткими представлениями о реальных возможностях растровой микроскопии. Между тем, СЭМ обладает широким диапазоном увеличений, высокой разрешающей способностью, дает возможность изучать большие по площади участки ткани и, что особенно важно, позволяет получать трехмерные изображения исследуемого объекта.

Этот метод открывает широкие возможности для гистотопографических исследований, позволяет получать трехмерные картины сетей лимфатических капилляров и сосудов, визуализировать внутренний рельеф их стенки.

1Перечень конкретных методических подходов, используемых в настоящее время для изучения ультраструктуры кровеносных и лимфатических микрососудов, подробно изложен в одной из наших обзорных работ [Караганов Я. Л. и др., 1980].


«Микролимфология», В.В.Купирянов, Ю.И. Бородин


Способы заполнения лимфатической системы при использовании коммерческой ММА

Заполнение лимфатической системы может осуществляться при этом способе подготовки инъекционной массы несколькими путями: посредством прямой наливки, интерстициальной инъекции, ретроградного введения смолы, а также трансгемокапиллярной инъекции. Смотрите - Подготовка коммерческого ММА Наблюдения показали, что последний способ выявления корней лимфатической системы особенно эффективен при введении инъекционной массы в кровеносное русло сокращающихся органов (например сердца), а также при…


Информативность СЭМ

Информативность СЭМ заставляет более подробно остановиться на некоторых технических аспектах, знакомство с которыми облегчает практическую работу. Для удобства описания все методы СЭМ, которые могут быть использованы для изучения лимфатической системы, предложено в зависимости от применяемой техники делить на три группы [Караганов Я. Л. и др., 1980]: СЭМ коррозионных препаратов; СЭМ клеточных поверхностей и неклеточных структур;…


Ряд ограничений и артефактов присущих методу инъекционных реплик

Накопленный опыт позволяет отметить ряд ограничений и артефактов присущих методу инъекционных реплик: некоторое искажение реальной структуры микрососудов, возникающее в процессе получения реплик; потеря ряда ультраструктурных деталей на репликах (неполное копирование); невозможность одновременного изучения строения стенки лимфатических капилляров (сосудов) и окружающей их соединительной ткани. Одной из главных ошибок, подстерегающих исследователей, использующих вышеописанный метод, является возможность неверной…


Монтирование образцов для лучшего стекания электронов и предотвращения возникновения зарядов

Монтирование образцов для лучшего стекания электронов и предотвращения возникновения зарядов на поверхности изучаемого объекта лучше осуществлять с помощью специального кондуктивного клея, который используется в микроэлектронике. Самое мелкодисперсное кондуктивное покрытие биологических объектов достигается с помощью метода ионного или катодного рассеивания ионов тяжелых металлов — серебра, золота, платины. Осмотр образцов рекомендуется проводить начиная с малых увеличений СЭМ,…