Второй этап Через 18—20 часов инкубации просматривают посевы на чашках. В положительных случаях отмечают колонии, характерные для стафилококков: на кровяном агаре — крупные с ровными краями и зоной гемолиза. Если через 24 часа на чашках с кровяным агаром гемолиз не появляется, следует оставить их еще на 24 часа при комнатной температуре. При отсутствии гемолиза делают…
Третий этап Выделенную чистую культуру стафилококка характеризуют, согласно комплексному методу исследования, с учетом целей обследования — диагностической, профилактической и т. д. В протоколе исследования отмечают морфологию, плазмокоагулирующую, гемолитическую и лецитиназную активность; принадлежность к фаготипу; результаты определения чувствительности выделенной культуры к антибиотикам, сульфаниламидам, препаратам нитрофуранового ряда. При необходимости специального изучения всех токсигенных свойств следует определить наличие летального…
Асептично взятую из вены кровь вносят (5 мл) во флакон питательного бульона (45 мл) и одновременно сеют в чашки Петри с желточно-солевым и кровяным агаром. При сепсисе лучшей средой для выращивания является среда Китт—Тароцци, которая перед посевом прогревается в водяной бане при 100°С 30 минут. Посевы крови (1:10 не более) можно делать в желчный бульон,…
При исследовании продуктов, содержащих большое количество соли (сельдь), не производят посевы на солевые среды; исследуя продукты, содержащие большое количество сахара (крем, мороженое), не производят посевы на сахарный бульон. Выделенную культуру идентифицируют по общим правилам дифференциации патогенного стафилококка. Тождество культур, высеваемых из продуктов со стафилококками, обнаруженными у больных, устанавливают методом фатотипизации. При условии установления идентичных фаготипов…
1-й день. Бактериоскопия мазков. Посев материала на чашки с желточно-солевым, кровяным агаром и в солевой (6,5—10%) бульон. 2-й день. Просмотр чашек с посевом нативного материала, отбор подозрительных колоний по лецитиназному и гемолитическому признакам. Бактериоскопия. Пересев на скошенный агар (рН = 7,2—7,4), чашку Петри с молочно-солевым агаром. Со сред обогащения делают высевы на чашки с желточно-солевым…
Гемолитические (свойства стафилококка выявляются в виде зоны гемолиза (просветления) вокруг колонии, при выращивании культуры на МПА с 5/0 дефибринированной крови. После посева культуры (или материала) на чашки Петри с 5% кроличьей крови посевы помещают в термостат при температуре 37° на 18—20 часов. Стафилококки довольно интенсивно гемолизируют эритроциты кролика. Чтобы зоны гемолиза не сливались (это затрудняет выделение…
Лецитиназная активность проявляется в расщеплении яичного желтка. Определяется лецитиназная реакция при посеве патогенных стафилококков на желточный агар в виде образования вокруг колоний зоны помутнения среды и радужного венчика на ее поверхности. Принадлежность к фаготипу. Довольно стабильным признаком является чувствительность патогенного стафилококка к одному или нескольким фагам. Метод типирования дает возможность установить источник возникновения стафилококковой инфекции…
С помощью метода фаготипирования стафилококков, применение которого было начато Fisk в 1942 году, можно установить источник и пути распространения инфекции. Фаготипированию подвергают коагулоположительные штаммы. Международным набором, состоящим из 22 фаготипов, удается типировать около 80% патогенных стафилококков.Набор типовых стафилококковых фагов разделен на 4 группы: № группы Номера фагов I 29, 52, 52А, 79, 80 II ЗА, ЗВ,…
Типирование штаммов начинают разведениями, соответствующими 1 TP фагов. Штаммы, давшие отрицательный результат (отсутствие лизиса хотя бы одним фагом), на следующий день типируют повторно разведениями фагов, соответствующими 100 ТР. Культура засевается в бульон (Хоттингера или Мартена), инкубируется три часа, а затем пересевается «газоном» на чашки с МПА, содержащим 0,025—0,04% хлористого кальция. Дно чашки предварительно разграфляют на квадраты,…
Степень лизиса культуры разными разведениями фага регистрируют по схеме: + + + + — сливной (полный) лизис; + + Н полусливной лизис (в зоне лизиса незначительный рост культуры); + Н наличие в месте нанесения капли фага свыше 50 колоний фага (пятен лизиса); + — менее 20 колоний фага; полное отсутствие лизиса. Фаготип записывают в форме (перечня обозначений…