Сыворотку разводят физиологическим раствором хлористого натрия.
В каждую пробирку добавить 1 мл разведенного (из расчета лН/5) токсина и по одной капле промытых и разведенных (1+2) эритроцитов. Ставят контроль эритроцитов: 2 мл физиологического раствора + одна капля эритроцитов не должны давать гемолиза. Пробирки со смесью выдерживают в термостате при 37° один час и еще один час при комнатной температуре, а затем учитывают результаты:
Схема разведения сывороток, содержащих от 1 до 18 АЕ
№ пробирок | Сыворотка | Физиологический раствор | Разведения | Количество АЕ | Примечание |
1 | Неразведенная 0,6 мл | 2,4 | 1:5 | 1 АЕ | вылить 0,5 |
2 | Из первой 2 мл | 2,0 | 1:10 | 2 АЕ | |
3 | Из второй 1 мл | 0,5 | 1:15 | 3 АЕ | |
4 | Из второй 1 мл | 1,0 | 1:20 | 4 АЕ | |
5 | Из третьей 0,5 мл | 0,5 | 1:30 | 6 АЕ | |
6 | Из четвертой 0,5 мл | 0,5 | 1:40 | 8 АЕ | |
7 | Из второй 0,2 мл | 0,8 | 1:50 | 10 АЕ | |
8 | Из второй 0,2 мл | 1,0 | 1:63 | 12 АЕ | вылить 0,2 |
9 | Из второй 0,2 мл | 1,2 | 1:70 | 14 АЕ | вылить 0,4 |
10 | Из второй 0,2 мл | 1,4 | 1:80 | 16 АЕ | вылить 0,6 |
11 | Из второй 0,2 мл | 1,6 | 1:90 | 18 АЕ | вылить 0,8 |
Максимальное разведение сыворотки, в смеси с которой лН/5 токсина дает гемолиз не более чем на++, содержит 7б АЕ, а 1 мл неразведенной сыворотки содержит в пять раз больше, чем степень разведения.
Примечание. Разделы о изучении способности стафилококков вырабатывать токсин в жидкой среде, определения антитоксина и лН стафилококкового токсина составлены в соответствии с «Методическими указаниями по лабораторной диагностике стафилококковых инфекций» М., 1963.
«Бактериологическая диагностика и профилактика стафилококковых заболеваний»,
Н.Р.Иванов, Л.М.Скитева, Н.С.Солун