Титрование сывороток, содержащих более 1 АЕ в 1 мл

29.10.2010г.

Сыворотку разводят физиологическим раствором хлористого натрия.

В каждую пробирку добавить 1 мл разведенного (из расчета лН/5) токсина и по одной капле промытых и разведенных (1+2) эритроцитов. Ставят контроль эритроцитов: 2 мл физиологического раствора + одна капля эритроцитов не должны давать гемолиза. Пробирки со смесью выдерживают в термостате при 37° один час и еще один час при комнатной температуре, а затем учитывают результаты:

Схема разведения сывороток, содержащих от 1 до 18 АЕ

№ пробирок Сыворотка Физиологический раствор Разведения Количество АЕ Примечание
1 Неразведенная 0,6 мл 2,4 1:5 1 АЕ вылить 0,5
2 Из первой 2 мл 2,0 1:10 2 АЕ
3 Из второй 1 мл 0,5 1:15 3 АЕ
4 Из второй 1 мл 1,0 1:20 4 АЕ
5 Из третьей 0,5 мл 0,5 1:30 6 АЕ
6 Из четвертой 0,5 мл 0,5 1:40 8 АЕ
7 Из второй 0,2 мл 0,8 1:50 10 АЕ
8 Из второй 0,2 мл 1,0 1:63 12 АЕ вылить 0,2
9 Из второй 0,2 мл 1,2 1:70 14 АЕ вылить 0,4
10 Из второй 0,2 мл 1,4 1:80 16 АЕ вылить 0,6
11 Из второй 0,2 мл 1,6 1:90 18 АЕ вылить 0,8
  • гемолиз полный + + + +;
  • гемолиз почти полный + + + гемолиз 50% + +;
  • следы гемолиза +;
  • отсутствие гемолиза 0.

Максимальное разведение сыворотки, в смеси с которой лН/5 токсина дает гемолиз не более чем на++, содержит 7б АЕ, а 1 мл неразведенной сыворотки содержит в пять раз больше, чем степень разведения.

Примечание. Разделы о изучении способности стафилококков вырабатывать токсин в жидкой среде, определения антитоксина и лН стафилококкового токсина составлены в соответствии с «Методическими указаниями по лабораторной диагностике стафилококковых инфекций» М., 1963.

«Бактериологическая диагностика и профилактика стафилококковых заболеваний»,
Н.Р.Иванов, Л.М.Скитева, Н.С.Солун



Читайте далее: