Быстрый йодометрический тест

07.05.2010г.

Порошок пенициллина добавляют к фосфатному буферу при рН 6,0 до получения концентрации в растворе 6000 мкг/мл, 0,1 мл полученного раствора распределяют по стенке маленькой бактериальной пробирки. 

При помощи петли удаляют несколько колоний из 18 — 24-часовой тестовой культуры и делают массивную суспензию в растворе пенициллина (не менее 109 клеток в 1 мл). Дают отстояться смеси в течение 30 мин. 

Приливают 0,05 мл крахмального раствора (0,1 % раствора в воде) встряхивают. Добавляют 0,02 мл йодного реактива (готовят из расчета 2, 3 г йода кристаллического и 53,2 г калия йодида в 100 мл дистиллированной воды). Немедленно появляется синяя окраска в результате реакции йода и крахмала. Смесь встряхивают. 

Если синее окрашивание сохраняется дольше 10 мин, то культура не продуцирует фермент. Изменение окраски указывает на образование β-лактамазы. Научная группа ВОЗ рекомендует также ацидометрический тест.

«Болезни передающиеся при половых контактах»,
Ю.К.Скрипкин





Читайте далее: