Предварительно для реакции разводят все ингредиенты. На дно центрифужной пробирки микропипеткой наливают 0,05 мл испытуемой сыворотки, добавляют 0,35 мл смеси комплемента (0,05 мл) с антигеном (0,3 мл).
Пробирки энергично встряхивают в течение 30 с и оставляют при комнатной температуре на 30 мин, затем во все пробирки добавляют по 0,1 мл взвеси эритроцитов, пробирки энергично встряхивают в течение 30 с и оставляют в термостате при температуре 37 °С на 30 мин, после чего все пробирки центрифугируют при 1000 об/мин в течение 3 мин.
Учет результатов проводят путем подсчета бледных трепонем в надосадочной жидкости. Для этого 0.01 мл надосадочной жидкости микропипеткой наносят на предметное стекло, покрывают покровным стеклом и в темном поле зрения подсчитывают число бледных трепонем в 10 полях зрения. Для облегчения подсчета рекомендуется использовать 11-клавишный лейкоцитарный счетчик.
При этом на первой клавише (слева) учитывается число полей зрения, а на последней клавише (справа) — число трепонем в 10 полях зрения.
При просмотре препарата под микроскопом учитываются только те бледные трепонемы, которые могут свободно перемещаться с током жидкости. Те же трепонемы, которые попали в поле зрения с током жидкости дополнительно, после начала подсчета («приплывшие»), в этом поле зрения уже не учитываются.
Процент прилипания бледных трепонем исчисляется по формуле:
100-Оп*100/К,
где:
При иммунном прилипании бледных трепонем, равном 0 — 20%, результат расценивается как отрицательный, 21 — 30% — как сомнительный, 31 — 50% — слабоположительный и при 51 — 100% — как положительный. В ответе результат реакции выписывается без указания процента.
В случае несовпадения результатов РИП с данными других реакций необходимо провести повторный учет результатов РИП с вновь приготовленным препаратом, повторить постановку реакции с этой же сывороткой крови, при необходимости повторить РИП с сывороткой крови, взятой у обследуемого повторно.
РИП следует применять в следующих случаях: при диагностике тех форм сифилиса, когда на основании данных анамнеза, клиники, результатов КСР и других исследований не удается подтвердить диагноз заболевания, при дифференцировании неспецифических результатов КСР, при контрольном наблюдении после окончания лечения. Специфичность и чувствительность РИП близки РИБТ и РИФ.
«Болезни передающиеся при половых контактах»,
Ю.К.Скрипкин