В опытах на летально облученных (880 р) животных изучено влияние замороженных лимфоцитов инактивировать несингенные (экзогенные) КОЕ. Для этого реципиенту-гибриду F1 вводили клетки лимфоузлов, селезенки или костного мозга мышей СВА (киллеры) в смеси с интактными клетками костного мозга мышей С57В16 (мишени).
Эффективность гемотрансфузионной терапии при травматической болезни
Показано, что использование интактных (не замороженных) клеток лимфоузлов, селезенки и костного мозга в дозе 0,5 — 10 вызывало, соответственно, 100; 79,8 и 36,4%-ную инактивацию несингенных стволовых элементов. При использовании замороженных клеток лимфоузлов эффект инактивации при дозе клеток 0,5 — 10 значительно снижен.
Для получения максимальной 99,4%-ной инактивации потребовалось ввести 4,0 — 106 замороженных лиимфоцитав, т. е. в 8 раз больше, чем свежих. Инактивирующая активность замороженных клеток селезенки также оказалась сниженной (при дозе замороженных клеток 0,5 — 106 инактивация составляла 50,9%, а с той же дозой свежие клетки давали инактивацию экзогенных КОЕ, равную 79,8%.
Аналогичная картина получена при взаимодействии клеток костного мозга. При введении смертельно облученным реципиентам-мышам (СВА X С57В16) F1 смеси замороженных клеток костного мозга мышей СВА со свежими клетками костного мозга мышей С57В16 в соотношении 1:1 инактивации практически не получено (И. И. ± 3%). И только при увеличении дозы замороженных клеток-киллеров в 4 раза (2,0 — 10) получен эффект инактивации, равный 21% (Л. А. Данилова, А. Г. Федотенков, Р. В. Петров, Л. П. Игнашева, Л. С. Сеславина, 1978 г.).
Еще больший интерес представляли опыты, где и клетки-мишени и клетки-киллеры были подвергнуты замораживанию с 15%-ным глицерином. Исследования показали, что замороженные клетки-киллеры не дают инактивирующего эффекта в отношении замороженных клеток-мишеней ни соотношении клеточной взвеси, равной 1:1, ни при увеличении клеток-киллеров в 2; 4 и 8 раз.
Напротив, число колоний в организме смертельно облученного реципиента при этом неуклонно возрастало и превышало сумму колоний, полученных от введения клеток каждого из доноров в отдельности.
Полученные данные свидетельствуют о том, что при трансплантации животному-реципиенту адлогенного костного мозга от нескольких доноров, криоконсервированного с 15%-ным глицерином, можно не только снизить инактивацию стволовых клеток несингенными лимфоцитами, но и получить эффект усиления экзогенного колониеобразования.
Следовательно, при трансплантации реципиенту замороженного костного мозга от генетически различающихся доноров не только снижается опасность несовместимости лимфоцитов и стволовых клеток, но и возрастает его лечебный эффект.
Изменение экзогенного колониеобразования (макроскопический учет) после введения смертельно облученному реципиенты замороженного костного мозга двух генетически различающихся доноров
Группы | Доза клеток на 106 | Среднее число колоний (М ± m) | Индекс инактивации (%) | |
СВА | С57В16 | |||
1 | 0,5 | 0,5 | 7,4 ± 0,1 | 0 |
2 | 1,0 | 0,5 | 11,6 ± 0,09 | 0 |
3 | 2,0 | 0,5 | 18,9 ± 0,05 | 0 |
4 | 4,0 | 0,5 | 26,3 ± 0,04 | 0 |
5 | — | 0,5 | 0,9 ± 0,04 | — |
6 | 0,5 | — | 4,0 ± 0,07 | — |
7 | 1,0 | — | 5,6 ± 0,1 | — |
8 | 2,0 | — | 10,0 ± 0,1 | — |
9 | 4,0 | — | 16,1 ± 0,3 | — |
10 | контроль облучения | 0,3 ± 0,01 | — |
Очевидно также, что при трансплантации криоконсервированного костного мозга может быть пересмотрено положение о невозможности трансплантации костного мозга от двух и более генетически различающихся доноров 20.
«Гемокомпонентная инфузионная терапия
и парентеральное питание»,
А.Г.Федотенков, Л.Я.Игнашева, Л.А.Данилова